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20×快速蛋白電泳緩沖液(變性電泳,溶液型)
● 產品組成:
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貨號 |
名稱 |
規格 |
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TG200 |
20×快速蛋白電泳緩沖液(變性電泳,溶液型) |
500 ml |
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說明書 |
一份 |
● 產品簡介:
本產品為20×濃縮型快速蛋白電泳緩沖液,由Tris-Glycine電泳緩沖液優化而來,適用于Tris-Glycine體系(Laemmli體系)蛋白凝膠電泳。與傳統的Tris-Glycine電泳緩沖液相比,使用本產品電泳時無需根據分離膠和濃縮膠調整不同電壓,可全程200-250 V恒壓電泳,約20-35 min可完成電泳(低于10%膠濃度),大大節約時間,并且對小分子蛋白分離效果更好,可使預染蛋白Marker中10 kD與15 kD條帶分離并清晰可見(凝膠濃度8%以上),達到快速高效分離蛋白的作用。本產品含有SDS,不適用于非變性電泳。本產品為20×濃縮液,使用前需要用水稀釋為1×后使用,無需調節pH值,pH 8.0-8.5。
● 貯存和效期:
4-8度貯存,常溫運輸,有效期1年。
● 用前必讀:
1. 和傳統的SDS-PAGE電泳液(Laemmli系統,1×Tris-Glycine-SDS電泳緩沖液,25 mM Tris,192 mM Glycine,0.1% SDS,pH8.3)相比,本快速電泳液可以大幅加快電泳速度,縮短電泳時間。推薦200-250 V恒壓電泳,低于10%膠濃度凝膠通常20-35分鐘就能完成電泳。
2. 使用快速電泳緩沖液單板膠電泳時,穩壓200 V,起始電流在45-60 mA,如果同時電泳2板膠或者4板膠,電流會升高,請根據需求采取降溫措施。
3. 對于低濃度例如6%、8%或10%的固定濃度膠,本快速電泳液比傳統電泳液具有更好的分離效果,可以達到類似梯度膠的分離效果,更適合小分子量蛋白電泳,蛋白Marker 10 kD條帶清晰分離。產生相同分離效果時,使用本快速電泳液可使用濃度更低的分離膠,例如使用傳統電泳液對10%、分離膠進行電泳時,使用本快速電泳液時對應的分離膠只需要8%即可,電泳效果基本一致,并且由于膠濃度較低,可以增強轉膜效率,提高WB檢測靈敏度。
4. 本快速電泳液含有SDS,適用于變性膠蛋白電泳,不適用于非變性電泳(Native-PAGE)。
5. 該快速電泳緩沖液建議用于經典Laemmli系統配制的凝膠,經測試可以達到最優的分離效果。對于其他電泳系統如Bis-Tris系統,HEPES系統,Tris-醋酸系統,Tricine系統等,需要經過驗證測試后使用。
6. 本快速電泳液可以適當回收,回收后的電泳液可以作為外槽電泳液再使用1-2次。如果希望獲得最佳的電泳效果,請勿使用回收的電泳液。內槽緩沖液每次都需要使用新鮮配制的電泳緩沖液。
● 使用說明:
1. 即用型1×快速蛋白電泳緩沖液配制:
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1×快速蛋白電泳緩沖液配制量 |
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500 ml |
1 L |
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20×緩沖液 |
25 ml |
50 ml |
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超純水 |
475 ml |
950 ml |
注:配制好的1×電泳緩沖液建議4℃貯存,可保存1-2周。如果出現變色或沉淀請重新配制新鮮的電泳液。
2. 電泳條件:
全程恒壓電泳,電壓建議為200-250 V。一般情況下,恒壓250 V電泳時,對于濃度為10%的分離膠僅需~22分鐘即可完成電泳。如果需獲得更加平整和銳利的條帶,可以把電壓調整為150 V,此時電泳時間需要適當延長。
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電泳電壓與電泳時間(min)對照表 |
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Laemmli凝膠濃度 |
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6% |
8%膠 |
10%膠 |
12% |
15% |
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200 V |
~30 |
~30 |
~33 |
~40 |
~48 |
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250 V |
~18 |
~18 |
~22 |
~30 |
~35 |
● 不同蛋白大小選擇不同的分離膠濃度,參考下表:
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Laemmli系統 SDS-PAGE分離膠濃度 |
最佳分離范圍(kD) 1×快速蛋白電泳緩沖液 |
最佳分離范圍(kD) 1×Tris-Glycine-SDS電泳緩沖液 |
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6% |
15-300 |
50-350 |
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8% |
10-250 |
35-300 |
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10% |
5-150 |
20-150 |
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12% |
3-100 |
15-100 |
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15% |
低于60 |
10-80 |
● 實驗示例:

SDS-PAGE快速電泳液(TG190)用于各種濃度分離膠的電泳效果圖
上圖為各種濃度分離膠使用快速電泳液的效果圖,
下圖為相同凝膠使用傳統的Tris-甘氨酸電泳液(TG120)的效果圖。
6%~15%的凝膠使用SDS-PAGE凝膠配制試劑盒配制(RTD6116)
樣品:1,2 使用5×雙色蛋白上樣緩沖液 (變性,還原)(PL090)配制;
3 三色預染寬分子量蛋白Marker II(10-250 kD)(RTD6149),上樣5 μl;
4 雙色預染寬分子量蛋白Marker(10-170KD)(RTD6105),上樣5 μl;
電泳條件:恒壓200 V
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